間充質干細胞成脂分化染色試劑盒

Adipo-dye for adipocytes staining kit in adipogenic differentiation

【包裝規(guī)格】

【預期用途】

適用于間充質干細胞成脂分化后的脂肪細胞染色，尤其適合作為BI MSCgo^TM  Adipogenic XF (BI 05-330-1-1B & 05-3311-01 & 05-332-1-15)成脂分化后的染色驗證之用。

【檢驗原理】

油紅O染料(OilRed-O)屬于蘇丹染料家族的一員，是一種脂溶性的偶氮染料。由于顯色明顯，便于觀察，廣泛用于脂肪染色。在成脂分化作用下，間充質干細胞(MSC,MesenchymalStemCell)會先后誘導分化為前成脂細胞(Preadipocytes)和脂肪細胞(Adipocytes)，后者聚集著大大小小的脂肪滴(Lipiddroplets)。油紅O在脂肪中的溶解度大于其在染液中的溶解度，因而使脂肪著色，呈現紅色或橘紅色。

【主要組成成分】

主要成分為油紅O。

【適用范圍】

間充質干細胞成脂分化后的脂肪細胞染色驗證。

【樣本要求】

待檢的樣本應為間充質干細胞成脂分化后形成的脂肪細胞。推薦使用BI MSCgo^TM Adipogenic XF進行成脂分化誘導。

【使用方法】

以操作一個T25flask為例：

染色前準備，將Adipo-StainingA(C37A30012)與Adipo-StainingB(C37A4-0008)按3:2的體積比混合，即為染色工作液(Working Staining Solution)，每個T25培養(yǎng)瓶需用3ml染色工作液。每次使用現用現配，3小時內使用。

1.吸棄分化培養(yǎng)基，加入1mlDPBS(VCC3590-0500)輕輕潤洗培養(yǎng)瓶底面。

2.吸棄DPBS，加入3mlAdipo-Fixation(C37A1-0020)，輕輕晃動培養(yǎng)瓶，使底面浸潤均勻。室溫下靜置30分鐘。

3.吸棄Adipo-Fixation，加入3mlAdipo-WahI(C37A2-0050)，潤洗底面，靜置2-3分鐘。

4.吸棄Adipo-WashI，加入3mlStainingSolution，均勻浸潤底面，室溫靜置染色30分鐘。

5.吸棄StainingSolution,加入3mlAdipo-WashII(C37A5-0050)，潤洗底面。

6. 吸棄Wash II，重復第5步，再次漂洗細胞 (如若上清依然很紅，可延長漂洗時間或再漂洗一次。注意：不要把細胞沖下來)。 

7. 吸棄 Wash II ，加入 1 ml Adipo Inspection (C37A6-0010)，置于顯微鏡下觀察、拍照。

【檢驗結果的解釋】

在顯微鏡下，可觀察到脂肪細胞內的油脂滴與油紅染料結合呈現出明顯的紅色或深紅色(如下圖所示)。被染色細胞的數量和染色的深度會受到多種因素的影響，例如：細胞類型、細胞代數、分化時間和培養(yǎng)條件等。

【儲存條件及有效期】

本產品應在2-8°C儲存，并在產品標簽上注明的有效期內使用。有效期為18個月。藍冰運輸。

【注意事項】

1.嚴禁內服，不能用嘴吸液。

2.試劑包裝如有破損，嚴禁使用。

3.操作人員在檢驗時應做好防護。

4.與皮膚、粘膜接觸，請立即用自來水沖洗。

5.禁止使用超出規(guī)定有效期的產品。

僅用于科研使用，不能用于臨床診斷和治療。