間充質干細胞成骨分化染色試劑盒

Osteo-dye for osteocytes staining kit in osteogenic differentiation

【包裝規(guī)格】

【預期用途】 

適用于間充質干細胞成骨分化后的骨細胞染色， 尤其適合作為BI MSCgo^TM Osteogenic XF ( BI 05-440-1B 或 05-442-1B) 成骨分化后的染色驗證之用。 

【檢驗原理】 

茜素紅 S (Alizarin Red S) 是一種常用的示鈣 染劑，廣泛用作生物醫(yī)學樣本中含鈣目標物的染 色檢驗。游離的鈣離子可與茜素紅 S 形成紅色 沉淀；固著的鈣則會被直接染成紅色。 在成骨誘導分化作用下，間充質干細胞 (MSC, Mesenchymal Stem Cell) 會被逐漸分化為骨 細胞(Osteoblasts)，包括鈣化骨節(jié)(鈣鹽結晶體) 的形成 (Calcium nodules formation) 和細胞 的泌鈣反應 (Calcium secretion)。兩者均可被茜素紅S染成紅色。 

【主要組成成分】 

主要成分為茜素紅S。 

【適用范圍】 

間充質干細胞成骨分化后的骨細胞染色驗證。 

【樣本要求】 

待檢的樣本應為間充質干細胞成骨分化后形 成的骨細胞。推薦使用 BI MSCgoTM Osteogenic XF 進行成骨分化誘導。 

【使用方法】 

以操作一個T25 flask為例： 

1. 吸棄分化培養(yǎng)基，加入 1 ml DPBS (VC C3590-0500) 輕輕潤洗培養(yǎng)瓶底面。 

2. 吸棄 DPBS，加入 3 ml Fixation solution (C37C1-0020)，輕輕晃動培養(yǎng)瓶，使底面浸潤 均勻。室溫下靜置30 分鐘。 

3. 吸棄Fixation solution ；加入3 ml Wash I (C37C2-0050)，潤洗細胞2-3次。 

4. 吸棄Wash I，加入3 ml Staining Solution (C37C3-0020)，底面浸潤均勻，室溫染色30分 鐘。 

5. 吸棄Staining Solution，加入 3 ml Wash II (C37C4-0050)，潤洗細胞2-3次。 

6. 吸棄 Wash II，加入 1 ml Inspection Solution (C37C5-0010)，置于顯微鏡下觀察、 拍照 (分化后的骨細胞會被染成橘紅色)。

【檢驗結果的解釋】 

在顯微鏡下，可觀察到鈣化骨節(jié)與茜素紅染料結 合后呈現(xiàn)紅色或橘紅色（如下圖所示）。被染色 細胞的數(shù)量和染色的深度會受到多種因素的影響，例如：細胞類型、細胞代數(shù)、分化時間和培養(yǎng)條件等。

【儲存條件及有效期】 

本產(chǎn)品應在 2-8°C 儲存，并在產(chǎn)品標簽上注明 的有效期內使用。 有效期為18個月。 藍冰運輸。

【注意事項】 

1. 嚴禁內服，不能用嘴吸液。 

2. 試劑包裝如有破損，嚴禁使用。 

3. 操作人員在檢驗時應做好防護。 

4. 與皮膚、粘膜接觸，請立即用自來水沖洗。 

5. 禁止使用超出規(guī)定有效期的產(chǎn)品。 

僅用于科研使用，不能用于臨床診斷和治療。