Improved General Phosphatase Inhibitor Cocktail (100xStock Solution) 

改進型廣譜磷酸酶抑制劑混合物（100x儲液）

產品簡介：

細胞內蛋白的磷酸化和去磷酸化是信號轉導、細胞增殖、分化和凋亡等重要生理活動的調控開關，這兩種作用主要通過蛋白激酶和磷酸酶的相互協調來實現。體外研究中，由于組織或者細胞經裂解會釋放出大量的酶原，這些酶原會被激活從而開始消化隨之釋放的待研究蛋白，不僅影響對蛋白真實水平的了解，甚至由于某些蛋白含量很低，再經進一步降解，無法檢測到，干擾對調控機制的正確研究。為此，體外研究，最大限度還原蛋白在細胞內的原始狀態極其重要，可通過蛋白酶抑制劑和磷酸酶抑制劑的組合使用來達此目的。

本品A，B兩管的形式提供，A管是多種傳統磷酸酶抑制劑的混合物，包含氟化鈉，正釩酸鈉，咪唑，鉬酸鈉，酒石酸鈉等成分；B管是近年發現的一批天然代謝產物，具有更特別的磷酸酶抑制效果，也進一步增加了磷酸化保護范圍。本品廣譜抑制非特異性的酸性和堿性磷酸酶，以及特異性的酪氨酸磷酸酶，絲氨酸和蘇氨酸蛋白磷酸酶等。

本品以100×儲存液的形式提供，可用來保護來源于原代細胞、哺乳動物細胞、動植物、細菌、酵母等組織或細胞等裂解物中的多種磷酸化蛋白維持本來狀態，適用于蛋白純化，蛋白免疫印跡（Western Blot），免疫（共）沉淀（IP/Co-IP），蛋白下拉（Pull-down assay），免疫熒光（IF），免疫組化（IHC），以及激酶研究等多種實驗。

保存條件: 

-20℃保存，1年穩定。

產品成分：

產品使用：

1） 使用前室溫平衡直至完全溶解【注意：混合物 B 液為溶于 DMSO 的溶液，融化很慢，建議放到 25℃ 水浴鍋內促進融化】 ，低速震蕩以保證各成分均勻。

2） 按照 1:100 的比例（體積比）加入樣品溶液（比如細胞或組織裂解液）中。分步加入 A、B 液：先加 A 液，混勻；再加 B 液，再一次混勻。

注意事項：

1.      DTT、EDTA和EGTA對正釩酸鈉活性的發揮會有影響。

2.      本品與常用的去垢劑如1% SDS，Triton，和NP-40兼容。

3.      本品具廣譜磷酸酶抑制活性，不具有蛋白酶抑制活性?？膳浜?span style="text-decoration:underline;">蛋白酶抑制劑Cocktail (無EDTA, 100×溶于DMSO)（貨號：NBS0001-1ml）一起使用以實現蛋白的全面保護。

4.      為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。

常見問題：

1.  混合物B液需要長時間融化？

因混合物B液是溶于DMSO。DMSO融化很慢，尤其是在低溫環境下。建議25℃水浴促進融化。第一次使用將B液根據單次用量分裝，比如10×100 μl，一方面能延長保存周期，一方面也能縮短融化時間。

2.  為什么磷酸化蛋白和非磷酸化蛋白的Western條帶都非常弱？

此種情況需加入蛋白酶抑制劑Cocktail (無EDTA, 100×溶于DMSO)（貨號：NBS0001-1ml）以保護總蛋白不被降解。

3.  貴司提供兩種磷酸酶抑制劑混合物，廣譜磷酸酶抑制劑混合物（貨號：NBS8061-1ml）和改進型廣譜磷酸酶抑制劑混合物（貨號：NBS8062-2ml），兩者有什么差別？

兩者的差別主要在于所含的磷酸酶抑制劑組分不同，后者使用近些年發現的一批天然代謝產物，具有更特別的磷酸酶抑制廣度。用戶根據自身研究的磷酸化蛋白和細胞或組織特點來選擇，大部分應用，兩者可相互替換。

常見蛋白酶抑制劑和磷酸酶抑制劑：