磁珠法質(zhì)粒DNA小量提取試劑盒（單條孔）

產(chǎn)品介紹 

磁珠法質(zhì)粒DNA抽提試劑盒采用經(jīng)典的SDS堿裂解法充分裂解釋放質(zhì)粒，再通過醇介導(dǎo)將質(zhì)粒結(jié)合于納米磁珠表面，經(jīng)洗液洗去蛋白等雜質(zhì)， 最后洗脫得到高純的質(zhì)粒產(chǎn)物。產(chǎn)物可用于酶切、轉(zhuǎn)化、PCR、測序等分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)。

注意事項(xiàng) 

1 使用前檢查各組分是否出現(xiàn)沉淀。若有，請(qǐng)輕輕搖晃混合均勻，或37℃水浴重新溶解。 

2 使用前請(qǐng)將RNase(20mg/ml)全部加入溶液 P1 中，用完置于4℃保存。

使用流程 

樣本預(yù)處理 

1 取1-5ml 細(xì)菌培養(yǎng)物，加入離心管中，使用常規(guī)臺(tái)式離心機(jī)12,000rpm（~13,400×g）離心1-5 min ，盡量吸盡上清。（菌液較多時(shí)可以通 過多次離心將菌體沉淀收集到一個(gè)離心管中）。 

2 向留有菌體沉淀的離心管中加入100 μl 溶液 P1（請(qǐng)先檢查是否加入RNase），使用移液器或渦旋振蕩器徹底懸浮細(xì)菌沉淀。注意：如果 菌體未徹底混勻，質(zhì)粒提取量和純度會(huì)偏低。 

3 向離心管中加入100 μl 溶液 P2，溫和的上下翻轉(zhuǎn)6-8次使菌體充分裂解，室溫靜置1~ 5 min（時(shí)間不宜過長），以免質(zhì)粒DNA受到破壞 。 

4 向離心管中加入100 μl 溶液 P3，立即溫和地上下翻轉(zhuǎn)6-8次，充分混勻，此時(shí)會(huì)出現(xiàn)白色絮狀沉淀。12,000rpm（~13,400×g）離心 5min，小心吸取全部上清，備用。

自動(dòng)化法提取 -MagET? Smart 8 

1 取出MagET? 質(zhì)粒DNA預(yù)分裝試劑條，顛倒混勻數(shù)次使磁珠重懸，輕甩MagET? 質(zhì)粒DNA預(yù)分裝試劑條使試劑及磁珠均集中到試劑 條底部。

注：使用前小心撕去鋁箔封口膜，避免MagET? 質(zhì)粒DNA預(yù)分裝試劑條振動(dòng)，防止液體濺出。 

2 在MagET? 質(zhì)粒DNA預(yù)分裝試劑條的第 2 孔中加入 3.1.4 中預(yù)處理后的全部上清液，將MagET? 質(zhì)粒DNA預(yù)分裝試劑條置于 MagET? Smart 8的試劑盒支架上。

注：請(qǐng)?jiān)诩訕雍?h內(nèi)上機(jī)運(yùn)行程序。 

3 用移液器準(zhǔn)確吸取 100 μl洗脫液，加入到MagET? 洗脫管中，將MagET? 洗脫管置于于 MagET? Smart 8的試劑盒支架上，將試劑盒支架安裝于 MagET? Smart 8設(shè)備底座上。

4 將MagET? 4孔磁棒套插入 MagET? Smart 8 磁棒套架卡槽內(nèi)。

5 選擇程序并運(yùn)行，自動(dòng)化程序結(jié)束后，取下MagET? 4孔磁棒套丟棄，拿出試劑盒支架，取下MagET? 洗脫管，蓋上管蓋，即得質(zhì)粒 DNA 產(chǎn)物。如不能及時(shí)進(jìn)行下游試驗(yàn)，質(zhì)粒DNA 樣本可短期保存于 -20℃。

表1. MagET? Smart 8 程序設(shè)定