磁珠法植物基因組DNA提取試劑盒（預(yù)分裝）

產(chǎn)品介紹 

磁珠法植物基因組DNA提取試劑盒為經(jīng)濟(jì)植物樣本的基因組DNA快速制備提供了一個(gè)簡(jiǎn)單快速的解決方案。該試劑盒采用獨(dú)特的緩沖液系 統(tǒng)，充分裂解植物細(xì)胞釋放基因，再通過醇介導(dǎo)將基因結(jié)合于納米磁珠表面，經(jīng)洗雜液洗去蛋白等雜質(zhì)，最后在低鹽條件下洗脫得到高純的基因 組DNA。提取過程無需使用有毒的酚、氯仿抽提，也無需進(jìn)行耗時(shí)的醇類沉淀。提取的產(chǎn)物可用于PCR、載體構(gòu)建、核酸雜交、高通量測(cè)序、轉(zhuǎn)基 因檢測(cè)等下游實(shí)驗(yàn)。

注意事項(xiàng) 

1 使用前檢查各組分是否出現(xiàn)沉淀。若有，請(qǐng)輕輕搖晃混合均勻，或37℃水浴重新溶解。 

2 RNase(20mg/ml) 請(qǐng)置于-20℃保存。 

3 使用前請(qǐng)將1ml DTT全部加入到裂解液 PA中去，并置于4℃保存，保質(zhì)期6個(gè)月。 

4 沉淀緩沖液使用前請(qǐng)放置冰上預(yù)冷。

使用流程

樣本預(yù)處理

1 對(duì)于纖維含量高的植物組織樣本，將樣本加入液氮研磨或使用組織研磨杵研磨成粉末；對(duì)于纖維含量低的植物組織，將組織剪碎成小塊。 

2 稱取預(yù)處理好的植物組織樣本50-100 mg，迅速將樣本加入預(yù)先裝有裂解液 PA（已加入DTT）的離心管中，用槍頭吹打均勻后，依次加入 40 μl RNase(20mg/ml) 、50 μl 裂解液 PB 渦旋混勻，65℃孵育10-30 min。種子樣本建議起始用量10 mg。 

3 向上一步離心管中加入130 μl 沉淀緩沖液，震蕩混勻，直至出現(xiàn)沉淀。 

4 12,000 rpm（~13,400×g），離心5 min，使用移液器小心將全部上清轉(zhuǎn)移到新的離心管中。

自動(dòng)化法提取- MagET? Smart 16

1 取出MagET? 植物DNA預(yù)分裝試劑板，顛倒混勻數(shù)次使磁珠重懸，輕甩MagET? 植物DNA預(yù)分裝試劑板使試劑及磁珠集中到孔板 底部。

注：使用前小心撕去鋁箔封口膜，避免MagET? 植物DNA預(yù)分裝試劑板劇烈振動(dòng)，防止液體濺出。 

2 將之前預(yù)處理的全部上清液轉(zhuǎn)入MagET? 植物DNA預(yù)分裝試劑板的第2,8列，將MagET? 植物DNA預(yù)分裝試劑板置于 MagET? Smart 16底座上。

注：請(qǐng)?jiān)诩訕雍? h內(nèi)上機(jī)運(yùn)行程序。

3 將MagET? 8孔磁棒套插入MagET? Smart 16核酸提取儀磁棒套架卡槽內(nèi)。 

4 選擇程序并運(yùn)行，自動(dòng)化程序結(jié)束后，取下MagET? 8孔磁棒套丟棄。取出MagET? 植物DNA預(yù)分裝試劑板，使用移液器從MagET? 植物DNA預(yù)分裝試劑板的第6,12列吸取出洗脫產(chǎn)物，即得植物基因組DNA。如不能及時(shí)進(jìn)行下游試驗(yàn)，DNA樣本可短期保存于-20℃

表1.MagETTM Smart 16 程序設(shè)定