FM 4-64 (N-(3-Triethylammoniumpropyl)-4-(6-(4-(Diethylamino) Phenyl) Hexatrienyl) Pyridinium Dibromide) 

神經(jīng)末梢熒光探針

產(chǎn)品簡(jiǎn)介：

FM 4-64，英文全名：N-(3-Triethylammoniumpropyl)-4-(6-(4-(Diethylamino) Phenyl) Hexatrienyl) Pyridinium Dibromide，是一種親脂的苯乙烯染料，用作一種活細(xì)胞探針示蹤酵母整體膜內(nèi)在化和運(yùn)輸?shù)揭号荨?span>FM 4-64是一種靈敏的液泡動(dòng)力學(xué)分析探針，檢測(cè)一系列相關(guān)事件，包括有絲分裂中的分離結(jié)構(gòu)形成、液泡分裂和融合事件，以及液泡蛋白質(zhì)分揀蛋白突變體在不同階段的液泡形態(tài)。

FM 4-64具水溶性、對(duì)細(xì)胞無(wú)毒性，在水溶液中基本無(wú)熒光，一旦插入脂膜表面發(fā)出強(qiáng)的紅色熒光。FM 4-64與呈綠色熒光的FM1-43（貨號(hào)：NBS3210）在合適的濾片能夠區(qū)分開，允許雙色實(shí)時(shí)觀察膜的再循環(huán)。

產(chǎn)品特性：

1） 同義名：N-(3-Triethylammoniumpropyl)-4-(6-(4-(diethylamino)phenyl)hexatrienyl)pyridinium dibromide

2） 分子式：C30H45Br2N3

3） 分子量：607.51

4） 純度：≥90%（HPLC）

5） 外觀：紫色固體 

6） 溶解性：溶于水、DMSO

7） Ex/Em：558/734nm

8） 溶解性：溶于水

9）化學(xué)結(jié)構(gòu)圖：

保存條件: 

-20°C避光干燥保存，至少1年有效。

產(chǎn)品使用：

1. 儲(chǔ)存液配制

于實(shí)驗(yàn)前，將凍干粉置于室溫回溫至少20min，加入無(wú)菌水或DMSO配制成10mM或其他濃度儲(chǔ)存液，比如，對(duì)于1mg FM 4-64（MW: 607.51）加入164μl DMSO,充分溶解后即得到10mM儲(chǔ)存液，根據(jù)單次用量分裝，≤-20℃凍存，避免反復(fù)凍融。

2. 染色方法（僅作參考）

【注意】：a）以下以爬片生長(zhǎng)的貼壁活細(xì)胞的質(zhì)膜染色為例，僅作參考。最佳的染色條件根據(jù)使用細(xì)胞特征進(jìn)行調(diào)整。

b）由于FM 4-64快速被內(nèi)吞，很有必要參考下方的溫度和時(shí)間指導(dǎo)來(lái)減慢內(nèi)吞，提高質(zhì)膜的選擇性標(biāo)記和成像。內(nèi)吞很可能在染色的10min內(nèi)發(fā)生。

c）以下步驟推薦使用不含鈣鎂的HBSS。鈣鎂的存在明顯會(huì)加速染料內(nèi)吞，導(dǎo)致質(zhì)膜選擇性染色很弱。

2.1用提前冰浴的HBSS緩沖液來(lái)稀釋儲(chǔ)存液到所需的工作濃度比如8μM。

2.2將蓋玻片從培養(yǎng)基內(nèi)取出，快速的浸入含足量FM 4-64的染色工作液，冰上孵育1min。質(zhì)膜能被快速染色。

2.3將蓋玻片從染色工作液中取出，置于載玻片上封片，周圍用石蠟密封，置于冰上，立即成像。

注意事項(xiàng)：

1.      熒光染料都存在淬滅的問(wèn)題，保存和操作過(guò)程中注意避光。

2.      FM^?是Molecular Probe公司的注冊(cè)商標(biāo)。

3.      為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

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