Coumarin Boronic Acid (CBA) (ONOO- Fluorescent Probe) 香豆素硼酸

產(chǎn)品簡介：

香豆素硼酸（Coumarin Boronic Acid, CBA），是一款熒光探針，用來檢測過氧亞硝基（ONOO-）、次氯酸（HClO）和過氧化氫（H2O2）[1-3]。香豆素硼酸與過氧亞硝基的反應(yīng)指數(shù)級速度（k = 1.1 μM/s）快于過氧化氫（k =1.5 M/s），適當(dāng)速度快于次氯酸。過氧亞硝基氧化香豆素硼酸生成熒光產(chǎn)物-7-羥基香豆素（COH），最大激發(fā)和發(fā)射波長分別是332nm和470nm。

產(chǎn)品特征：

1）同義名：CBA; coumarin-7-boronic acid; (2-Oxochromen-7-yl)boronic acid;香豆素-7-硼酸；

2）化學(xué)名：B-(2-oxo-2H-1-benzopyran-7-yl)-boronic acid

3）CAS NO.：1357078-03-5

4）分子式：C9H7BO4

5）分子量：189.96

6）外觀：固體

7）純度：≥95%

8）溶解性：溶于DMSO（3mg/ml）、乙醇（1mg/ml）、DMF（10mg/ml），DMSO:PBS (pH 7.2) (1:1) (0.5mg/ml)

9）化學(xué)結(jié)構(gòu)圖：

保存條件: 

-20℃避光干燥保存，至少2年有效。

產(chǎn)品使用：（來自文獻(xiàn)，僅作參考）

用CBA測定巨噬細(xì)胞光敏氧化后蛋白過氧化氫（H₂O₂）的生成水平

方法如下：RAW 264.7細(xì)胞用HBSS清洗后，加入含5μM 孟加拉玫瑰紅的HBSS于37℃避光孵育30min。細(xì)胞用HBSS清洗兩次后，更換成新鮮的HBSS。之后將細(xì)胞置于冰上，暴露于可見光下（100w白熾燈）光照高達(dá)60min。光照結(jié)束后立即加入過氧化氫酶（580 units/ml），室溫孵育2min。細(xì)胞用DPBS清洗后，用1ml DPBS刮下來轉(zhuǎn)移到離心管，離心后，清楚上清液，細(xì)胞沉淀用液氮冷凍，之后保存在-80℃。細(xì)胞沉淀重懸后，用含DTPA（0.1mM）和過氧化氫酶（100units/ml）的水裂解。制備好的細(xì)胞裂解物轉(zhuǎn)到96孔板，用含DTPA（0.1mM）、過氧化氫酶（100units/ml）和CBA（0.8mM）的磷酸緩沖液（50mM, pH 7.4）混勻。樣本置于時(shí)未能孵育2h，之后在熒光酶標(biāo)儀中測定生成的COH。

注意事項(xiàng)：

1.      為了讓化合物更好的溶解，可通過37℃加熱或（和）超聲波水浴中震動(dòng)片刻來處理。若實(shí)驗(yàn)所需濃度過大甚至達(dá)產(chǎn)品溶解極限，請?zhí)砑又軇┲芑蜃孕姓{(diào)整濃度。

2.      為了您的安全和健康，請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

相關(guān)產(chǎn)品：