BCA蛋白定量試劑盒（增強型）

產品簡介：

BCA 蛋白定量試劑盒（增強型）(Enhanced BCA Protein Assay Kit)根據常規BCA蛋白定量法研制升級而成，可 通過簡單操作在實驗室進行溶液的蛋白定量，測試靈敏度高、速度快、兼容性好。 與常規BCA蛋白定量試劑盒相比，本試劑盒靈敏度更高：檢測濃度下限為10μg/ml，最小蛋白檢測量為0.2μg。 與常規BCA蛋白定量試劑盒相比，本試劑盒顯色速度更快：相同的樣品孵育較短時間即可進行吸光度測定。 本試劑盒在待測樣品蛋白濃度20-1500μg/ml范圍內有較好的線性關系。 本試劑盒兼容性好，待測樣品中5%的SDS，5%的Triton X-100，5%的Tween20、60、80，10mM的MEDTA，1mM的D TT，0.01%的β-巰基乙醇對測試結果不產生影響。

保存條件: 

室溫保存（1年有效）。

產品組成：

室溫保存。蛋白標準配制成溶液后-20oC凍存。

產品使用：

1. 蛋白標準品的準備

a. 用試劑盒內提供的注射器，將整支蛋白標準配制液加入到一支蛋白標準安瓿瓶(25mgBSA)中，充分溶解后配制成25mg/ml的蛋白標準溶液。配制后可立即使用，剩余的標準溶液請置-20oC長期保存。

b. 取適量25mg/ml蛋白標準，用待測蛋白樣品的溶解液稀釋，至終濃度為0.5mg/ml。 注意：請確保用待測蛋白樣品的溶解液來稀釋標準品以達到最佳測試結果。若無法確定待測蛋白樣品的溶解液，則可以用0.9% NaCl 或PBS稀釋標準品。稀釋后的0.5mg/ml蛋白標準可以-20oC長期保存。

2. BCA工作液的配制

根據樣品數量，按50體積BCA試劑A加1體積BCA試劑B(50:1)配制適量BCA工作液，充分混勻。例如 5ml BCA試劑A+100μlBCA試劑B，混勻后配制成5.1mlBCA工作液。

注意：配制好的BCA工作液可在室溫保存24小時。

3. 蛋白濃度檢測

a. 將標準品按0、1、2、4、8、12、16、20μl加到96孔板的標準品孔中，加不足20ul的標準品孔添加 標準品稀釋液補足到20μl，相當于標準品濃度分別為0、0.025、0.05、0.1、0.2、0.3、0.4、0.5mg/ml。

b. 加適當體積樣品到96孔板的樣品孔中。如果樣品不足20μl，加標準品稀釋液補足到20μl。請注意記 錄樣品體積。

c. 各孔加入200μlBCA工作液，37oC放置20-30分鐘。

注意: 也可以室溫放置2小時，或60oC放置30分鐘。BCA法測定蛋白濃度時，顏色會隨著時間的延長不斷加深。并且顯色 反應會因溫度升高而加快。如果濃度較低，適合在較高溫度孵育，或適當延長孵育時間。

d. 用酶標儀或分光光度計測定各標準或樣本A562，或540-595nm之間的波長的吸光度。

e. 根據標準曲線和使用的樣品體積計算出樣品的蛋白濃度。

注意事項：

1.      低溫條件或長期保存出現沉淀時，可攪拌或 37℃溫育或微波幾十秒使溶解, 如發現細菌污染則應丟棄。

2.      樣品中若含有濃度較高的EDTA、EGTA、DTT、硫酸銨、脂類會對檢測結果產生影響，請試用Bradford蛋白濃度測定試劑盒；高濃度的去垢劑也影響實驗結果，可用 TCA 沉淀去除干擾物質。

3.      為得到精確的蛋白濃度結果，每個蛋白梯度和樣品均需做復孔且標準品與樣品處理需盡量一致（如采用同樣 的溶液溶解樣品和標準品）, 每次均應做標準曲線。

4.      當試劑 A 和 B 混合時可能會有渾濁，但混勻后會消失。

5.      需準備 37℃水浴或孵育箱、酶標儀或普通分光光度計，測定波長為 540-595nm，562nm 最佳。酶標儀需與96 孔酶標板配套使用。使用溫箱孵育時，應注意防止因水分蒸發影響檢測結果。

6.      為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。

相關產品：