AF594標(biāo)記刀豆蛋白A

Alexa Fluor 594-Con A

產(chǎn)品簡介：

刀豆蛋白A（Concanavalin A，Con A），來源于Canavalia ensiformis洋刀豆（刀豆），是一種凝集素蛋白（Mw 104kDa）。pH≥7.0條件下，Con A以同質(zhì)四聚體結(jié)構(gòu)形式存在，由四個(gè)分子量為26kDa的亞基構(gòu)成。酸性條件（pH 4.5-5.5）下，Con A解離為活化的二聚體結(jié)構(gòu)（52kDa）。每一個(gè)單體，不管pH值或分子結(jié)構(gòu)如何，都包含2個(gè)金屬離子結(jié)合位點(diǎn)。金屬離子（Ca2+ 和Mn2+ ）必須結(jié)合到這兩個(gè)位點(diǎn)上Con A才能發(fā)揮活性。乙酰化、琥珀酰化或其他衍生物也能產(chǎn)生穩(wěn)定的二聚體結(jié)構(gòu)形式。

刀豆蛋白A（Concanavalin A，Con A）無血型特異性，但選擇性結(jié)合發(fā)現(xiàn)于各種糖蛋白、糖脂和糖類分子上的α-甘露糖基（α-mannosyl residues）和α-葡糖基殘基（α-glucosyl residues），需要Ca2+ 和Mn2+ 離子存在才能顯示活性。Con A適用于碳水化合物研究，糖蛋白純化，酶標(biāo)記（enzyme tagging），細(xì)胞膜研究，細(xì)胞凝集，和細(xì)胞分型研究。

本品是Alexa Fluor 594標(biāo)記的刀豆蛋白（Alexa Fluor 594 labeled Concanavalin A, Alexa Fluor 594-ConA），Ex/Em=590/617nm，親和純化所得，基本不含未標(biāo)記的熒光素。建議工作濃度范圍是5-25μg/ml。

產(chǎn)品特性

1）英文同義名：Concanavalin A from Canavalia ensiformis (Jack bean), Alexa Fluor 594 Conjugate;Alexa Fluor 594-ConA;Alexa Fluor 594 labeled Concanavalin A (ConA); ConAlectin(Alexa Fluor 594);

2）中文同義名：刀豆蛋白A來源于洋刀豆 （刀豆），Alexa Fluor 594標(biāo)記；Alexa Fluor 594標(biāo)記的刀豆凝集素A；Alexa Fluor 594標(biāo)記的刀豆球蛋白A；Alexa Fluor 594標(biāo)記的伴刀豆球蛋白A；

3）糖類特異性：α-甘露糖；α-葡萄糖；

4）外觀：固體

5）Ex/Em：590/617nm

6）熒光顏色：紅色

7）應(yīng)用：IF、糖生物學(xué)

保存條件: 

-20℃避光干燥保存，至少1年有效。

產(chǎn)品使用：

一、儲(chǔ)存液準(zhǔn)備

于使用前，將低溫保存的Alexa Fluor 594-ConA（1mg）置于室溫回溫至少30min，低速離心2-3min，往管內(nèi)加入500μl ddH₂O（無菌）制備2mg/ml儲(chǔ)存液。短時(shí)間使用可保存在2-8℃，長時(shí)間使用請(qǐng)根據(jù)單次用量分裝保存后置于-20℃保存，避免反復(fù)凍融，至少一個(gè)月穩(wěn)定。

二、活細(xì)胞染色

【注①】于使用前將低溫保存的產(chǎn)品置于室溫使其完全融化，之后低速離心，吸取上清，用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。這一步驟能去除本品保存過程中可能形成的蛋白聚集物，從而降低非特異性背景染色。

【注②】刀豆蛋白偶聯(lián)物（比如：Alexa Fluor 594-ConA）對(duì)細(xì)胞質(zhì)膜染色，且在質(zhì)膜內(nèi)陷后最終對(duì)胞內(nèi)囊泡染色。

三、固定細(xì)胞染色

【注①】于使用前將低溫保存的產(chǎn)品置于室溫使其完全融化，之后低速離心，吸取上清，用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。這一步驟能去除本品保存過程中可能形成的蛋白聚集物，從而降低非特異性背景染色。

【注②】刀豆蛋白偶聯(lián)物（比如：Alexa Fluor 594-ConA）不具細(xì)胞膜滲透性，因此，固定（未透化）的細(xì)胞呈現(xiàn)細(xì)胞質(zhì)膜染色。如果，細(xì)胞固定后再做透化處理，會(huì)引起胞漿質(zhì)膜的染色。

注意事項(xiàng)：

1.      本品儲(chǔ)存液長期保存可能會(huì)產(chǎn)生沉淀，使用前請(qǐng)37℃溫育數(shù)分鐘，之后離心吸取上清使用。此操作基本不會(huì)對(duì)產(chǎn)生性能造成負(fù)影響。

2.      熒光染料都存在淬滅的問題，保存和操作過程中注意避光。

3.      為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

相關(guān)產(chǎn)品：