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細胞/組織基因組DNA提取試劑盒（離心柱法）

產品介紹 

本試劑盒用于快速從多種細胞/組織中提取基因組DNA，采用特異性結合DNA的離心吸附柱和緩沖液系統協同作用裂解細胞釋放基因組，然后選擇性去除蛋白等雜質。離心吸附柱中選用的硅基質材料為新型材料，可以高效、專一吸附DNA，最大限度的去除雜蛋白以及細胞中其他的有機 化合物。提取的基因組DNA完整性好、純度高，質量穩定可靠。適用于PCR、酶切、文庫構建、核酸雜交、二代測序等下游實驗。

注意事項 

1 使用前檢查各組分是否出現沉淀。若有，請輕輕搖晃混合均勻，或37℃水浴重新溶解。

2 蛋白酶K請置于-20℃保存。  

3 洗滌液 I和洗滌液 II使用前請按標簽提示加無水乙醇，混合均勻，并在瓶子上做好標記。 

4 結合液為異丙醇，請自備。

使用流程

樣品預處理

1 貼壁培養的細胞：應先處理為細胞懸液，1,000rpm（~11,20×g）離心3min，收集培養細胞，轉移到新的離心管中。 

2 動物組織，應先用切取5-20mg動物組織材料，在液氮中研磨成粉末或勻漿處理為細胞懸液，轉移到新的離心管中。

DNA提取

1 向預處理的樣品中加入200μl裂解液 TL，20μl蛋白酶 K溶液，混勻。56℃放置10-15min，短暫離心以去除管蓋內壁的水珠。 

2 加入250μl異丙醇，渦旋混勻，此時可能會出現絮狀沉淀，短暫離心。 

3 將步驟2所得溶液和絮狀沉淀全部轉移到吸附柱AP20中，（吸附柱AP 20放入收集管中），12,000rpm（~13,400×g）離心1min，倒掉廢液，將吸附柱AP20放入收集管中。 

4 向吸附柱AP 20中加入500μl洗滌液 I（使用前請先檢查是否已加入無水乙醇），12,000rpm（~13,400×g）離心1min，倒掉廢液，將吸附 柱AP 20放入收集管中。 

5 向吸附柱AP 20中加入500μl洗滌液 II（使用前請先檢查是否已加入無水乙醇），12,000rpm（~13,400×g）離心1min，倒掉廢液，將吸 附柱AP 20放入收集管中。

6 重復步驟5 一次。

7 將吸附柱AP 20 放回收集管中，12,000rpm（~13,400×g）離心2min，倒掉廢液，將吸附柱AP 20放入收集管中，以徹底晾干吸附柱中 殘余的洗滌液 II，以免洗滌液 II中殘留的乙醇影響后續的反應。

8 將吸附柱AP 20 轉入一個干凈的離心管中，向吸附膜的中間部位懸空滴加50-100μl洗脫液，室溫放置2-5min，12,000rpm （~13,400×g）離心2min，將溶液收集到離心管中，如不立即進行下游實驗，于-20℃保存樣品。

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