<NW3217> 外泌體綠色熒光標(biāo)記染料（PKH67）

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<NW3217> 外泌體綠色熒光標(biāo)記染料（PKH67）

外泌體綠色熒光標(biāo)記染料（PKH67）
Exosome Green Fluorescent labeling dye（PKH67）
貨號：NW3217
規(guī)格：20 μL（1mM）
品牌：NoninBio

促銷：￥750.00

價(jià)格：￥750.00

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貨號：

NW3217

規(guī)格：

20 μL

產(chǎn)品詳細(xì)

外泌體綠色熒光標(biāo)記染料（PKH67）

Exosome Green Fluorescent labeling dye（PKH67）

產(chǎn)品編號	產(chǎn)品名稱	包裝規(guī)格
NW3217	外泌體綠色熒光標(biāo)記染料（PKH67）	20μL（1mM）

【溫馨提示】：見我司整理的專注外泌體研究，外泌體提取專家，專注外泌體提取試劑盒產(chǎn)品專題。

產(chǎn)品簡介：

熒光染料PKH67 是?種可對體外和體內(nèi)細(xì)胞示蹤的綠色熒光染料，通過與膜結(jié)構(gòu)的脂質(zhì)分子結(jié)合到細(xì)胞膜脂質(zhì)區(qū)域上。PKH67對細(xì)胞毒性較小，熒光背景低，脂溶性高，能夠輕易穿透細(xì)胞膜，有著強(qiáng)而穩(wěn)定的綠色熒光。該試劑可以在染色過程中增加染色效率，同時(shí)維持細(xì)胞活力?？捎糜谕饷隗w的標(biāo)記染色實(shí)驗(yàn)，監(jiān)測細(xì)胞吞噬作用。

產(chǎn)品組成：

組分	名稱	規(guī)格
A	PKH67 linker（for green fluorescent cell labeling）	20 μL
B	Diluent C（for General Membrane Labeling）	200 μL

熒光波長：λ_ex 490 nm；λ_em 502 nm

保存條件:

2-8℃避光（一年有效）

產(chǎn)品使用：

一、外泌體蛋白定量：

取適量外泌體進(jìn)行 BCA 蛋白濃度測定以確定外泌體蛋白量；

二、染料工作液制備：

用“Diluent C”將“PKH67 linker（for green fluorescent cell labeling）” 儲存液稀釋10倍，配制濃度為100 μM 的染料工作液（避光操作，工作液應(yīng)根據(jù)實(shí)驗(yàn)用量適當(dāng)配制，現(xiàn)配現(xiàn)用）；

三、外泌體染色：

1. 在外泌體中加入染料工作液，建議加入劑量如下：

外泌體蛋白量	加入染料工作液劑量
10 - 200 μg	50 μL
200 - 500 μg	100 μL
500 - 1000 μg	200 μL

2. 加入染料工作液后將離心管蓋緊，通過渦旋振蕩器混勻1 min，再靜置孵育10min；

3. 向孵育后的外泌體-染料復(fù)合物中加入10 mL的1×PBS混勻；

4. 按照外泌體提取方法再次提取外泌體以去除多余染料；

5. 取200μL 1×PBS重懸沉淀物，沉淀即為染色后的外泌體。

注意：過度染色會導(dǎo)致外泌體膜完整性喪失，最佳PKH67染料/外泌體用量需根據(jù)自身實(shí)驗(yàn)而決定。

注意事項(xiàng)：

1、PKH67 母液易水解，建議分裝保存，分裝后用封口膜密封保存；

2、PKH67 工作液應(yīng)現(xiàn)配現(xiàn)用，不能提前配制，否則將影響染色效果；

3、PKH67 溶解液在較低溫度下會凝固而粘在管底內(nèi)，可以 37℃水浴片刻至全部融解后使用。

常見問題：

1. 建議用于染料標(biāo)記的外泌體原始濃度達(dá)到 0.5~1 μg/μL。外泌體濃度過低實(shí)驗(yàn)失敗風(fēng)險(xiǎn)較高。

2. 外泌體染色步驟中去除游離染料的步驟必不可少，以避免游離染料對后期實(shí)驗(yàn)的干擾。這一步相當(dāng)于重新提取外泌體，所有外泌體提取純化方式都適用。

3. 染料標(biāo)記外泌體與細(xì)胞共孵育的培養(yǎng)條件盡可能使用無血清培養(yǎng)基，以提高細(xì)胞對染料標(biāo)記外泌體的攝取效率，共孵育參考時(shí)長為2~24 h。

4. 本染料也可用于細(xì)胞膜染色，參考劑量染料濃度為2 μM，細(xì)胞濃度為1×10⁷ cells/mL。

5. 由于外泌體染色效率難以達(dá)到100%，且在去除游離染料過程中無法避免外泌體的損失，因此，建議制備2倍于共孵育實(shí)驗(yàn)所需外泌體量以進(jìn)行染料標(biāo)記實(shí)驗(yàn)。

本產(chǎn)品僅用于生命科學(xué)研究，不得用于醫(yī)學(xué)診斷及其他用途！

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