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<NW3210> 外泌體提取純化試劑盒(尿液)

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<NW3210> 外泌體提取純化試劑盒(尿液)

外泌體提取純化試劑盒(尿液)
貨號(hào):NW3210-2T;
NW3210-20T
品牌:NoninBio
促銷: 600.00~5000.00
價(jià)格: 600.00~5000.00
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外泌體提取試劑盒(尿液)

 

產(chǎn)品編號(hào)

產(chǎn)品名稱

包裝規(guī)格

NW3210-2T

外泌體提取純化試劑盒(尿液)

2T

NW3210-20T

外泌體提取純化試劑盒(尿液)

20T

【溫馨提示】:見我司整理的專注外泌體研究,外泌體提取專家,專注外泌體提取試劑盒產(chǎn)品專題。

產(chǎn)品簡(jiǎn)介:

外泌體是由細(xì)胞分泌的包含RNA和蛋白質(zhì)的小囊泡(30-150 nm),在血液、唾液、尿液及乳汁等體液中大量存在。外泌體被認(rèn)為具有細(xì)胞間信使的功能,在特定細(xì)胞之間傳遞它們的效應(yīng)物或信號(hào)分子;然而其構(gòu)造、效應(yīng)物組成以及所參與的生物學(xué)通路目前尚不明晰。

外泌體的生物學(xué)功能研究中需要分離完整的外泌體顆粒,而傳統(tǒng)超速離心方法步驟繁瑣、硬件要求高、操作難度大。由本公司自主開發(fā)的外泌體提取試劑盒,組分經(jīng)過優(yōu)化處理,適用于尿液中的外泌體提取,可快速高效地獲得外泌體顆粒,可用于電鏡分析、NTA 粒徑分析、核酸分析、蛋白分析、細(xì)胞學(xué)實(shí)驗(yàn)和動(dòng)物實(shí)驗(yàn)等。

 

保存條件

室溫保存,2年有效。

 

產(chǎn)品組成:

名稱

NW3210-2T

NW3210-20T

Exosome Concentration Solution*

12 mL

120 mL

Exosome Solution Buffer*

1 mL

10 mL

50 mL 離心過濾柱

2個(gè)

20個(gè)

* Nuclease-free, Sterile

 

自備材料:

高速離心機(jī),渦旋振蕩器,50 mL離心管,1.5 mL離心管,1×PBS緩沖液(無菌)。

 

產(chǎn)品使用:

一、 樣品預(yù)處理

1.      取樣:如果是凍存樣品,從冰箱取出后于25℃水浴中進(jìn)行解凍,將完全融化后的樣品置于冰上,如果是新鮮樣品,收集樣品后置于冰上;

2.      樣品初始用量:?jiǎn)未翁崛r(shí)的尿液量建議不低于20 mL

3.      離心去細(xì)胞碎片:將樣品轉(zhuǎn)移至離心管中,于 4℃ 3,000 ×g~5,200 rpm**)離心10 min,去除樣品中的細(xì)胞碎片(注:若沉淀較多,可3,000 ×g10 min 離心多次至無明顯沉淀,每次取離心上清液);

**為約10 cm有效離心半徑的大離心機(jī)換算(≥15 mL離心管),下同。

4.      離心去雜質(zhì)碎片:將離心上清液轉(zhuǎn)移至新的離心管中,于4℃10,000 ×g~9,500 rpm**)離心10 min,去除樣品中的雜質(zhì)碎片;

5.      樣本過濾:去除雜質(zhì)碎片的離心上清液轉(zhuǎn)移到 50 mL 離心過濾柱中,于4℃3,000 ×g~5,200 rpm**)離心10 min,取過濾柱下室液體(注:若上室中有殘 留液體,可重復(fù)本步驟以獲得更多樣本量);

6.      上清液轉(zhuǎn)移:去除雜質(zhì)碎片的上清液轉(zhuǎn)移到新離心管中。

 

二、 提取外泌體

1.      上清液預(yù)處理:在去除雜質(zhì)的離心上清液中加入 Exosome Concentration SolutionECS 試劑),具體的加入劑量為每20 mL尿液加4 mL ECS試劑;

2.      溶液混合:加入 ECS 試劑后將離心管蓋緊,通過渦旋 振蕩器混勻1 min,再放置于4℃靜置8h以上(注:增加靜置時(shí)間可提高外泌體得率,但不可超過24 h);

3.      沉淀外泌體:取出裝有混合液的離心管于4℃10,000 ×g~9,500 rpm**)離心60 min,棄上清,沉淀中富含外泌體顆粒(注:盡可能吸盡上清液);

4.      再次離心:將含有沉淀的離心管再次于 4℃ 10,000 ×g~9,500 rpm**)離心2 min,棄上清(注:盡可能吸盡上清液);

5.      外泌體重懸:取合適量的 Exosome Solution BufferESB試劑)均勻吹打離心沉淀物,待其溶解后,將重懸液轉(zhuǎn)移至新的1.5 mL離心管中(建議每20 mL尿液用200 μL 左右ESB試劑重懸);

6.      收獲外泌體顆粒:將含有重懸液的1.5 mL離心管于4℃ 12,000 ×g~12,400 rpm*)離心2 min,保留上清液,其中富含外泌體顆粒(注:若沉淀較多,可12,000 ×g2min離心多次至無明顯沉淀,每次取上清液)。

*為約7 cm有效離心半徑的小離心機(jī)換算(≤2 mL離心管)。

7.      外泌體的保存:純化后的外泌體以合適體積進(jìn)行分裝凍存于-80℃低溫冰箱中,以備后續(xù)實(shí)驗(yàn)使用。

 

注意事項(xiàng):

1.      為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

 

本產(chǎn)品僅用于生命科學(xué)研究,不得用于醫(yī)學(xué)診斷及其他用途!

 

相關(guān)產(chǎn)品:

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